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详细内容
一、产品信息:
1.平台编号:zl-056459
2.细胞名称:HeLa(人宫颈癌细胞)
3.物种:人,女性
4.组织:宫颈腺癌
5.细胞类型:肿瘤细胞
6.细胞形态:贴壁生长,呈现上皮细胞样
7.细胞背景:HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系,它是由GeyGO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV18序列,需在2级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)。二、培养方式:
1.培养基:HeLa专用培养基【RPMI 1640+10%FBS+1%P/S】
2.培养环境:37℃、5%CO2
3.传代培养:当细胞密度达到80%以上时,可以进行传代,传代比例1:2~1:4,1~2天传代一次。
(1)用巴氏滴管吸出细胞培养瓶内的培养基;
(2)加入1ml的PBS,轻轻晃动润洗细胞,然后将PBS吸出;
(3)加入1ml的胰酶,轻轻晃动浸润细胞,然后放在培养箱内消化1~2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间);
(4)在显微镜下观察,发现细胞变圆,轻轻晃动细胞便开始脱落,这时可以终止消化;
(5)加入4ml含血清的完全培养基,用移液器吹打细胞,使细胞脱落并形成单细胞悬液;
(6)将细胞悬液转移到15ml的离心管,1000rpm离心5min;
(7)离心完成后吸出上清丢弃,再用移液管取10ml完全培养基将细胞重悬,轻轻吹打混匀;
(8)将细胞悬液分装到两个新的T25细胞培养瓶中,放在37℃的CO2培养箱中进行培养。
4.细胞冻存:使用本公司无血清冻存液可直接将细胞冻存在-80℃(无需使用程序降温盒),细胞在-80℃可保存3年,长期保存建议使用液氮罐。
5.冷冻复苏细胞:将含有1mL细胞冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。三、质量检测:
1.STR鉴定:正确
2.细菌检测:阴性
3.支原体检测:阴性
四、售后服务:
1.收到细胞后请及时查看瓶身有无破损,是否漏液等现象;
2.用75%的酒精喷洒培养瓶之后,放在培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态,然后用显微镜观察细胞状态并拍照记录,40倍和100倍照片各一张(细胞在运输过程中存在少量的漂浮或者死亡属于正常现象);
3.原瓶中的培养基在细胞传代之后不建议继续使用,请配制新的完全培养基或者购买本公司的专用培养基(bio-54142和bio-51598);
4.建议定期对细胞进行拍照记录;收到细胞后7天内,对细胞生长状态有任何问题,可申请售后。
5.强烈建议:在第一次细胞传代时,使用附赠或者购买本公司配置的细胞培养瓶将细胞按照1:2进行传代,可以对比测试自配的培养基是否可以养好细胞。如果有以上任何问题,请及时联系本公司。
五、注意事项:
1.本产品仅限于科研用途,若用于临床诊断、治疗等其它用途,本公司概不负责!
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