H4人神经胶质瘤细胞

　　平台编号:zl-077221

　　细胞信息:H4

　　产品规格:1×10⁶cells/T25培养瓶

　　种属人

　　别称H-4

　　组织来源脑组织

　　疾病神经胶质瘤

　　传代比例/细胞消化1:2传代，消化1-2分钟

　　完全培养基配置DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗

　　简介该细胞源自一位37岁神经胶质瘤白人男性患者

　　形态上皮细胞样

　　生长特征贴壁生长

　　倍增时间每周2至3次

　　STR

　　Amelogenin:X,Y CSF1PO:10,12 D13S317:12 D16S539:11,12 D5S818:10,12 D7S820:8,11 THO1:7,9

　　TPOX:8,11 vWA:14,18

　　培养条件气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

　　冻存条件冻存液：90%FBS，DMSO 10%,

　　保藏机构ATCC;HTB-148

　　产品使用仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

　　细胞收到后处理：

　　细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）

　　细胞培养步骤：

　　1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

　　2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

　　1、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

　　方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

　　方法三：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

　　1）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO

　　PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代。

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