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近年,细胞培养技术在药理学研究中得到广泛应用,特别是药物对机体的药效作用,有无毒性作用,必须进行体内和体外实验。
(一)抗病毒、抗癌药物药效实验
近年随培养技术的发展,细胞培养成为测试药物效应的常用方法。
一般来说,细胞培养比较适用于单质药物测试,实验结果易于分析。在用复方药或中药进行实验时,由于药物成分多,可能存在着相互影响,易造成药效的准确性的差异,在进行这类药物实验中,对所获实验结果的分析和评估,应持谨慎态度。其次被检测药物需具有水溶性。做非永溶性药物测试时要用溶剂和应安排一组溶剂检测对照组以排除溶剂对细胞的作用。
细胞培养比较适用于抗癌药、抗病等的检测。方法是选择适宜的细胞(如二倍体成纤维细胞初代或传代细胞),给药方法有两种:细胞接种前给药或细胞生长中给药。接种前给药是把生长状态良好的细胞先制备成细胞悬液,在此悬液状态中加一定量待测药物,作用一定时间后,再进行接种培养的方法。细胞生长中加药是先接种细胞,待其贴壁生长至进入对数生长期时加药。细胞生长中加药是常用的测试药物方法。还有持续作用法,即从实验开始至结束持续让药物接触细胞.一定时间后观察培养细胞的变化,观察相应指标,判定药效作用。抗癌药物一般观察化学成分变化、形态结构变化、生长和增殖情况、基因表达或变异及细胞死亡等。抗病则通过测定TCID50计算药物对细胞保护的半效应量(ED50)判定药物抗病毒的作用。
(二)测定药物对细胞增殖的影响
检测药物对细胞生长是否有影响,是能促进细胞生长,还是能抑制细胞生长,可采用体外细胞培养技术,观察培养细胞加药后的增殖情况。常用的实验有绘制生长曲线的细胞培养实验、细胞集落形成实验及有丝分裂指数测定实验等。这些实验可以根据培养细胞在加药后出现不同的增殖指标,来判定药物对细胞增殖的影响。此外应用新技术膜片钳技术可以对培养的单个细胞膜药物受体结构及离子通道等进行研究,为深入探讨药物作用机制和有效药物的筛选提供实验平台。
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