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一、临床医生阅读微生物报告前需要了解的问题
首先是标本类型,是来源于无菌部位还是有菌部位,如果是无菌部位,那培养的阳性结果与感染更相关,如果是有菌部位,如呼吸道,要了解是否存在正常菌群或定植菌。
其次是标本采集部位、采集方式。如痰标本,是咳痰、吸取物、肺泡盥洗液,还是防污染毛刷、气切管分泌物。如尿液标本,是中段尿、导管尿,还是耻骨上穿刺尿。如血标本,是外周血、导管血,采血量是多少,抽了几套血。采血前是否使用抗生素,过去的微生物学检查结果是什么。
二、痰标本质量评估
痰标本易受到口咽部定值菌污染,不一定真正代表下呼吸道感染菌。送检时必须痰涂片和培养同时开。采集前应使用清水或生理盐水漱口,有假牙的应先取下假牙,嘱病人采集深部咳痰,直接收集入无菌螺旋口痰杯。1-2小时内送检,否则苛养菌(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等)易死亡。显微镜检查取脓性部分涂片,做革兰染色,每低倍镜视野中鳞状上皮细胞<10,白细胞>25,为合格下呼吸道标本。
对照痰涂片结果,仅对优势菌进行鉴定和药敏试验。非常强调痰涂片的重要性,不仅可以判断痰标本是否是下呼吸道标本,甚至根据微生物的形态和特殊染色,可以初步判断感染菌的类型,一个工作日内可以发报告,有助于临床尽早调整用药。
例如,涂片提示可疑放线菌,放线菌是厌氧菌,需要厌氧环境培养,可以提示临床医生加开厌氧菌培养申请单。需要临床医生的理解支持,才能鼓励检验科老师大胆创新,更好的为临床服务。
高质量下呼吸道标本包括:
1、支气管肺泡灌洗液。定量培养>104CFU/ml,具有诊断意义。离心涂片>1%细胞为鳞状上皮细胞提示污染,培养菌量可能假性提高。
2、保护性毛刷。毛刷约仅能获得0.01-0.001ml标本,在空气中很快会干燥导致细菌死亡,从而影响检出率,应放置于1ml液体运送培养基(如无菌生理盐水和无菌肉汤),振荡后,定量培养>103CFU/ml,具有诊断意义。
3、肺组织活检。滴加少量无菌生理盐水保持标本湿润,室温送检实验室,禁止冷藏。
4、气管吸取物:定量培养>106CFU/ml。
检验报告实例分析
1、痰培养结果为大肠埃希菌(超广谱β-内酰胺酶阳性),加酶抑制剂的药物敏感,碳青霉烯类药物敏感。头孢吡肟体外药敏试验结果“中介”时,提示为剂量依赖性敏感,建议给药方案为2g,q8h。
2、痰培养结果为碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌,对亚胺培南、美罗培南耐药,对阿米卡星、替加环素、米诺环素敏感,可以选择。
3、如果痰涂片白细胞及上皮细胞数均大于25,考虑取材来源于下呼吸道,但有上呼吸道污染,如果看到大量的阴性球杆菌,且看到有白细胞吞噬的,考虑仍有意义,也会做培养及药敏,但也建议重复留样。
4、痰培养结果为碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌,对亚胺培南、美罗培南耐药,可能对阿米卡星、左氧、他啶、特日欣等仍可能有效。
5、痰培养结果为铜绿假单胞菌。其他的菌通常在一周以内不重复做药敏,但因为铜绿假单胞菌容易在治疗3-4天后变得耐药,易形成生物膜,因此在治疗4天以后可能重复做药敏,尤其是粘液型菌落,可能体外敏感,体内耐药,需加用破坏生物膜的药物。
6、痰培养结果为碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌。亚胺培南、美罗培南耐药,仅可能对替加环素、米诺环素敏感,舒普深中介或敏感。也有部分(约20-30%)的鲍曼不动杆菌对碳青霉烯敏感,但需要足够的剂量,亚胺培南0.5,q6h;美罗培南0.5,q6h或1.0,q8h,才能达到体内体外一致的效果。
7、非发酵菌天然耐药表型。只做3种药物的药敏,因为有很多的天然耐药。如洋葱伯克霍尔德菌:仅替卡西林-克拉维酸、头孢他啶、美罗培南、米诺环素、左氧氟沙星、甲氧苄啶-磺胺甲恶唑、氯霉素有折点。嗜麦芽窄食单胞菌:仅替卡西林-克拉维酸、头孢他啶、米诺环素、左氧氟沙星、甲氧苄啶-磺胺甲恶唑、氯霉素有折点。
三、血培养
我国的血培养送检率仍低于国外水平。
留取标本要求:更推荐成人患者首次采集2-3套血培养(40-60ml),1套是指一个穿刺点,通常为1个需氧菌+1个厌氧菌,每瓶8-10ml血量。一周内不需要再采血送血培养。为什么使用需氧瓶+厌氧瓶?因为厌氧瓶有助于提高阳性率,厌氧瓶不仅仅针对厌氧菌,尤其对兼性苛氧菌,如肺炎链球菌等。
血培养结果中的报警时间是指从血培养瓶上机培养开始计算,到报警的时间。采血后及时上机培养。对于我们判断是致病菌还是污染菌,有意义。
检验报告实例分析
1、如果血培养结果是金黄色葡萄球菌。如果对头孢西汀敏感,对青霉素耐药,称为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,对不稳定的青霉素类耐药,对稳定的青霉素类敏感,对多种药物敏感。如果对青霉素耐药,对头孢西汀耐药,称为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,对所有酶类都耐药,所以只做头孢西汀的药敏,只有选择万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺有效。
2、如果血培养结果是表皮葡萄球菌。最常见的污染菌。是否污染,与采集的套数和阳性的套数有关。
四、总结
任何微生物报告的解读都不能脱离临床,需结合患者的临床症状和体征、影像学及其他检查结果,综合分析。标本类型、标本质量、采样和送检方式,是否存在定植菌或污染菌、采样前是否使用抗菌药物等,对微生物学结果有重要影响。微生物检验报告内涵丰富和信息量大,加强临床和实验室沟通,充分挖掘和利用微生物检验结果。
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