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　　一、细胞简介

　　平台编号：Bio-81822

　　规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶

　　细胞信息：C4-2

　　细胞名称：C4-2（人前列腺癌细胞）

　　组织：前列腺

　　细胞形态：贴壁生长

　　种属：人

　　生长特性：贴壁

　　培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

　　用途：研究

　　注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

　　二、培养方式

　　1、培养基：C4-2专用培养基【RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%】

　　2、培养环境：37℃、5%CO2

　　3、传代培养：当细胞密度达到80%以上时，可以进行传代，传代比例1:2~1:4，1~2天传代一次。

　　（1）用巴氏滴管吸出细胞培养瓶内的培养基；

　　（2）加入1ml的PBS，轻轻晃动润洗细胞，然后将PBS吸出；

　　（3）加入1ml的胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化2~3分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间）；

　　（4）在显微镜下观察，发现细胞变圆，轻轻晃动细胞便开始脱落，这时可以终止消化；

　　（5）加入4ml含血清的完全培养基，用移液器吹打细胞，使细胞脱落并形成单细胞悬液；

　　（6）将细胞悬液转移到15ml的离心管，1000rpm离心5min；

　　（7）离心完成后吸出上清丢弃，再用移液管取10ml完全培养基将细胞重悬，轻轻吹打混匀；

　　（8）将细胞悬液分装到两个新的T25细胞培养瓶中，放在37℃的CO2培养箱中进行培养。

　　4、细胞冻存：使用本公司无血清冻存液可直接将细胞冻存在-80℃（无需使用程序降温盒），细胞在-80℃可保存3年，长期保存建议使用液氮罐。

　　5、冷冻复苏细胞：将含有1mL细胞冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

　　三、质量检测

　　1、STR鉴定：正确

　　2、细菌检测：阴性

　　3、支原体检测：阴性

　　四、售后服务

　　1、收到细胞后请及时查看瓶身有无破损，是否漏液等现象；

　　2、用75%的酒精喷洒培养瓶之后，放在培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态，然后用显微镜观察细胞状态并拍照记录，40倍和100倍照片各一张（细胞在运输过程中存在少量的漂浮或者死亡属于正常现象）；

　　3、原瓶中的培养基在细胞传代之后不建议继续使用，请配制新的完全培养基或者购买本公司的专用培养基；

　　4、建议定期对细胞进行拍照记录；收到细胞后7天内，对细胞生长状态有任何问题，可申请售后。

　　5、强烈建议：在第一次细胞传代时，使用购买本公司配置的细胞培养瓶将细胞按照1:2进行传代，可以对比测试自配的培养基是否可以养好细胞。如果有以上任何问题，请及时联系本公司。

　　智立中特（武汉）生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用，围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求，探索、发现、收集国内外的微生物资源，妥善长期保存管理；在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！

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