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细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术,通过细胞培养既可以获得大量细胞,又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。
1、科学研究:药物研究开发与基础研究
药物研究与开发:新药筛选、疫苗
研究与开发、基因工程药物研究与开发、细胞工程药物研究与开发、单克隆抗体制备
基础研究:药物作用机理、基因功能、疾病发生机理
2、生物制药:疫苗生产、基因工程药物生产、诊断用和药用单克隆抗体生产、细胞工程药物生产细胞培养基本条件
3、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。
细胞培养基的种类很多,按其来源分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基),按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌,液体培养基由专业商家提供,用户可直接使用,非常方便。每种细胞都有其合适的培养基培养基:MEM、DMEM、IMDM、RPMI-1640、F12、F12K(具体细胞用什么培养基要以细胞说明书为准,每一种细胞的培养基都是不一样的)。
液体培养基保存:
液体培养基保存:4℃冰箱避光保存,实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良,可以再添加适量L-谷氨酰胺。
干粉培
养基保存:4℃冰箱避光保存,有效期36个月。
目前,市场上可提供干粉培养基和液体培养基。干粉培养基需使用者自己配制并灭菌,其优点是价格便宜。缺点是配制过程繁琐,质量不易控制。液体培养基是由专业产家按标准规模化生产,不仅质量得到保证,而且使用十分方便。
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