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蛋白酶K使用注意事项是什么

发布时间: 2024-08-15 15:20:36
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中文名称:蛋白酶K  
中文同义词:蛋白内切酶K;内肽酶 K;肽酶 K;
英文名称: Proteinase K
CAS号:39450-01-6
分子式:C29H27N2O12P
分子量:626.504641
纯度:电泳浓度99%   
酶活:32u/mg
规格:1g/瓶
性状;白色粉末
作用:生物检测试剂,去除DNA酶和RNA酶
保存方法:避光低温冷藏
蛋白酶K时常应用于分子生物学领域。在制备核酸时,蛋白酶K可以将杂蛋白去除,并迅速使核酸酶失活,避免其降解目标产物DNA和RNA。另外,蛋白酶K还有其他优点,它在变性剂存在下仍能保有活性,如SDS、尿素、EDTA等等,这点与其他蛋白酶(如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶)相当不同。
蛋白酶K的应用主要为核酸提取时去除DNA酶和RNA酶,并且可将结合于基因组上的组蛋白去除,还可用于碱性磷酸酶的失活。目前分子生物学技术已应用于许多检测标准中,例如转基因检测、动物属性检测、致病微生物检测等。在分子生物学检测中核酸的提取质量直接影响了后续PCR反应的扩增效率。许多标准在核酸提取步骤中都设立了添加蛋白酶K消化的步骤,以期提取较纯的核酸。为了保护核酸,分子生物学核酸提取实验中通常含有EDTA等试剂,由于EDTA可以与金属离子络合,因此可能会导致酶活性受到影响;并且通常为pH8.0时和55℃条件下进行消化,不同pH值和温度条件会使得酶活性受到影响。
分离DNA和RNA期间使核苷酸酶蛋白失活。去除内毒素对阳离子蛋白的约束,如溶菌酶和核糖核酸酶。研究报告显示用于分离肝,酵母,绿豆线粒体测定细胞膜上的酶用于抗体标记,石蜡包埋组织切片中暴露抗原结合位点。消化脑组织样本中的蛋白质,用于朊病毒的传染性海绵状脑病(TSE)的研究。
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